重復(fù)性(repeatability)與重現(xiàn)性(再現(xiàn)性,reproducibility),二者都是用來評價分析結(jié)果的精密度。大多數(shù)人都不作嚴(yán)格區(qū)分,有的文獻(xiàn)中還常?;煊?。但是二者的實際意義是不一樣的。
既然二者都是用來評價樣品精密度的,那首先來了解下評價精密度的三個概念。
重復(fù)性(r)
定性定義:
用相同的方法,同一試驗材料,在相同的條件下獲得的一系列結(jié)果之間的一致程度。相同的條件是指同一操作者,同一設(shè)備,同一實驗室和短暫的時間間隔。
定量定義:
一個數(shù)值,在上述條件下得到的兩次實驗結(jié)果之差的絕對值以某個指定的概率低于這個數(shù)值。除非另有說明,一般指定的概率為0.95。
重復(fù)性是用本方法在正常和正確操作情況下,由同一操作人員,在同一實驗室內(nèi),使用同一儀器,并在短期內(nèi),對相同試樣所作多個單次測試結(jié)果,在95%概率水平兩個獨立測試結(jié)果的最大差值。
重復(fù)性可測定可在規(guī)定范圍內(nèi),至少用9次測定結(jié)果進(jìn)行評價,如,制備3個不同濃度的試樣,各測定3次,或100%的濃度水平,用至少測定6次的結(jié)果進(jìn)行評價。
總結(jié):
在測試中當(dāng)測量條件是在以下4個狀況下實驗時,相同的待測量的測量結(jié)果有一致性的稱為重復(fù)性,4個條件如下:
1.相同的測量環(huán)境;
2.相同的測量儀器及在相同的條件下使用;
3.相同的位置;
4.在短時間內(nèi)的重復(fù);
中間精密度
中間精密度指在同一實驗室,由于實驗室內(nèi)部條件改變,如,時間、分析人員、儀器設(shè)備、測定結(jié)果的精密度;
驗證設(shè)計方案中的變動因素一般為日期、分析人員、設(shè)備;
重現(xiàn)性
定性定義:
用相同的方法,同一試驗材料,在不同的條件下獲得的單個結(jié)果之間的一致程度。不同的條件指不同操作者、不同實驗室、不同或相同的時間。
定量定義:
一個數(shù)值,用相同的方法,同一試驗材料,在上述的不同條件下得到的兩次試驗結(jié)果之間的絕對值以某個指定的概率低于這個數(shù)值。除非另外指出,一般指定的概率為0.95。
※指不同實驗室之間不同分析人員測定結(jié)果的精密度。當(dāng)分析方法將被法定標(biāo)準(zhǔn)采用時,應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗。
國外表示精密度的概念
三個表示精密度的概念,在國外的文獻(xiàn)中常見:
平行性(replicability):
同一實驗室,分析人員、分析方法均相同,對同一樣品進(jìn)行的多個平行樣品之間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差;
重復(fù)性(repeatability):
同一實驗室,分析人員用相同的分析法在短時間內(nèi)對同一樣品重復(fù)測定結(jié)果之間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差;
再現(xiàn)性(reproducibility):
不同實驗室的不同分析人員用相同分析對同一被測對象測定結(jié)果之間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。
國內(nèi)常把平行性和重復(fù)性混為一談,區(qū)別上面三個概念平行性就是我們做一個添加樣品設(shè)置的平行樣之間的變異系數(shù);重復(fù)性就是對同一被測對象我們在不同時間做出來的重復(fù)結(jié)果之間的變異系數(shù);而再現(xiàn)性很好理解,就是不同實驗室結(jié)果的變異系數(shù)啦。
舉例:
操作者1:29.5;28.0;28.3;29.3;28.8;29.6;28.8;28.6;27.9;28.0
操作者2:28.6;28.1;29.7;27.4;27.5;28.4;27.0;28.4;28.2;27.7
操作者3:26.9;28.1;28.1;28.2;29.4;29.2;27.0;26.0;26.5;27.9
針對上面的數(shù)據(jù)如果操作者1、2、3是不同實驗室的,則把三個人的10個測定值分別取平均值,再分別算出相對標(biāo)準(zhǔn)偏差,此即為“再現(xiàn)性”;
如果他們?nèi)耸峭粚嶒炇业模@三人之間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差就是實驗室內(nèi)的精密度;而其中每個人的10個數(shù)據(jù)值之間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差就是“平行性”或“重復(fù)性”。
小結(jié)
重復(fù)性(repeatability)與重現(xiàn)性(再現(xiàn)性,reproducibility),二者都是用來評價分析結(jié)果的精密度。大多數(shù)人都不作嚴(yán)格區(qū)分,有的文獻(xiàn)中還常常混用。但是二者的實際意義是不一樣的。重復(fù)性比重現(xiàn)性概念大,應(yīng)用范圍大。重現(xiàn)性內(nèi)涵小,一般用在“現(xiàn)象”。
對現(xiàn)代儀器分析而言,重復(fù)性是容易實現(xiàn)的,而重現(xiàn)性是更重要的,也是方法驗證必須考察的。方法的重現(xiàn)性包括連續(xù)多次進(jìn)樣分析的重復(fù)性、不同天數(shù)間的重復(fù)性、不同型號儀器間的重現(xiàn)性和不同實驗室間的重現(xiàn)性。
何時必須進(jìn)行重現(xiàn)性實驗?
當(dāng)分析方法將被法定標(biāo)準(zhǔn)采用時,應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗。例如,建立獸藥典分析方法時應(yīng)通過不同實驗室的復(fù)核檢驗得出重現(xiàn)性結(jié)果,復(fù)核檢驗的目的、過程、重現(xiàn)性結(jié)果均應(yīng)記載在起草說明中。應(yīng)注意重現(xiàn)性試驗用的樣品本身的質(zhì)量均勻性和貯存運輸中的環(huán)境影響因素,以免影響重現(xiàn)性結(jié)果。
重復(fù)性實驗和重現(xiàn)性實驗的先后順序?
方法開發(fā)人員,首先應(yīng)測定重復(fù)性。即在相同條件下連續(xù)進(jìn)樣5-10次,一般要求保留時間的RSD不大于1%,峰面積的RSD不大于5%。
如果樣品要經(jīng)過預(yù)處理,還應(yīng)測同一樣品多次處理的重復(fù)性。即同一樣品取3-5份作平行處理,測定結(jié)果的RSD不應(yīng)大于5%。某些工業(yè)分析要求不大于10%。至于天與天之間的重復(fù)性也不應(yīng)大于10%。
當(dāng)上述重復(fù)性滿足要求后,說明該方法在你的實驗室是可靠的。要將此方法推廣使用,還必須測定不同儀器、不同分析人員、不同實驗室之間的重現(xiàn)性。當(dāng)這些重現(xiàn)性都能滿足要求時,這一方法的的可靠性就得到較為滿意的驗證。